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  胎牛血清使用方法:在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的澳洲胎牛血清培养293t细胞,效果-。但是有些细胞也会使用5%的gibco fbs或者20%的澳洲胎牛血清,要根据具体 细胞选择合适的澳洲胎牛血清浓度。





     对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20 度/-80 度对绝大多数抗体来说,保存在-20 度是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80度 会有更多的好处!

(1) 分装可以zui大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

(2) 分装的量以一次实验用完为好,zui少不能少于10ul 每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响

(3) 复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4 度,避免再冻起来!

(4) 抗体工作液应该当天配制当天用完,在4 度 尽量不要超过1 天。

(5) 避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。



    细胞培养的污染源:微生物污染:微生物污染的原因可分为2个阶段:实验准备阶段和实验操作过程。准备阶段的原因包括:实验耗材灭菌不-;细胞房清洁度不够,增加微生物污染风险;超净台洁净度不够,消毒不够-,紫外线没有预先照射足够时间,表面没有用酒精擦拭;没有带无菌乳胶手套;试剂本身已经污染,没有检测出来。实验操作中的污染,往往是不够严谨,粗心大意造成,如:手从无菌试剂的上方经过;移液器操作不当,液体接触到移液器前端;移液管吸液过猛;枪头没有更换,较差污染等。不同的微生物污染物对细胞的影响也有差别,微生物中支原体和-对细胞形态和技能的影响是长期的,缓慢的和潜在的。而霉菌和-增殖迅速,能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质杀灭细胞。  



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