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要说为什么很多细胞培养的科研人都用到胎牛血清,那就不得不说说胎牛血清那-重要的作用。
1.提供维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别-、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解du作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
如何提取胎牛血清白蛋白的!
一、所需材料,胎牛血清取近郊屠宰场,以柠檬酸三钠为抗凝剂,-采集后随即分离出血浆备用。需要的试剂有血清白蛋白;xiu jia酚氯;-纤维素薄膜,其余试剂均为分析纯。提取胎牛血清白蛋白需要准备 lg-6型大容量冷冻离心机,df-c型电泳仪,uv-754型紫外可见分光光度计,phs-2型酸度计。
二、具体方法,白蛋白含量测定 采用xiu jia酚氯法,以胎牛血清白蛋白为标准. 白蛋白纯度的测定 采用-纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定 用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10 g/l时牛血清白蛋白的光吸收值,用a403表示。
细胞培养中常见的污染情况总结如下:
1、-:-在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感ran-的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。
仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生su处理。
2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用-铜溶液擦拭co2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的-铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消--二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。
购买胎牛血清通过哪些因素来进行评定
1、胎牛血清的功能性:因为大家在使用胎牛血清的时候,所需要利用的都是设备的功能,并且对于该胎牛血清说,也是需要通过自身的功能发挥来实现应用的。所以大家是需要根据这种设备的功能性,来对设备与否进行评定。
2、胎牛血清的-性:对于大家来说,在使用胎牛血清的时候,非常需要其能够在功能和长久使用方面都有-的保障,同时也需要其应用起来能够非常安全。如此大家在评定该设备是否的时候,其中一方面的评定因素,就是需要看胎牛血清的-性如何。
3、胎牛血清的服务:的胎牛血清在有-的品质的同时,也是应该有-的售后服务来保障的,所以胎牛血清的服务如何,也是其与否的评定因素之一。
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